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武汉爱基百客生物科技有限公司(简称爱基百客),位于武汉高农生物园,办公面积逾3000平方米,是一家专注于表观组学、单细胞时空组学和高通量测序分析服务的新型生物科技企业。


公司旨在为客户提供专业的科研服务,运营至今合作的科研客户近千家,涵盖国内知名科研院所、高校以及相关生物企业,运营至今销售额超1亿元,科研成果曾多次在CellScience、Cancer Cell、Plant Cell、Nature Communications、J HEMATOL ONCOL等国际高水平学术期刊发表,受到了客户广泛好评,是国内成长最迅速的多组学科研服务企业之一。

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收藏级!搞定单细胞注释:人/小鼠CD45+免疫细胞Marker全览 | 单细胞标记专题

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酝酿已久,诚意之作

爱基百客全新系列正式启航!

在单细胞分析中,注释的准确性往往是决定分析深度的关键。目前常用的注释方法,除了基于FindAllMarkers得到的Top基因进行功能定义外,也常常借助组织特异性标记基因绘制气泡图,从而辅助完成细胞类型的人工注释。

为助力从事单细胞研究的老师们实现更精准的细胞注释,爱基百客即将推出全新系列专栏《人/小鼠单细胞注释标记基因指南。本系列不定期更新,主要目的在于整理人源及小鼠不同组织中较为公认的细胞类型标记基因,内容基于小编梳理与相关文献总结。我们深知细胞注释的复杂性与前沿研究的动态变化,如有疏漏或不妥之处,真诚欢迎各位老师在评论区留言指正!让我们携手同行,一起探索单细胞世界的星辰大海。

本文系统梳理了CD45+常见免疫细胞的经典标记物,涵盖T细胞、B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞及肥大细胞等核心亚群。需要特别强调的是,许多免疫细胞具有显著的组织特异性特征——例如肝脏驻留的库普弗细胞(Kupffer Cells)、中枢神经系统的小胶质细胞(Microglia)、肺部的肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophages)等,其表型与循环或炎症诱导的髓系细胞存在本质差异。因此,在实际应用中,具体标记基因的选择需紧密结合组织来源与微环境背景进行综合分析,避免简单套用通用标记导致细胞类型误判。

T Cells(CD45+,淋巴细胞)


物种

基因

备注

CD3D


CD3E


CD3G


GZMA

高活化的细胞毒性T细胞

IL7R

初始T细胞和记忆T细胞

小鼠

Cd3g


Cd3e


Cd3d


Gzma

高活化的细胞毒性T细胞

Il7r

初始T细胞和记忆T细胞


B Cells(CD45+,淋巴细胞)


物种

基因

备注

CD79A


CD79B


CD19


BANK1


MS4A1(CD20))

成熟B细胞表面标志物

CD22


PAX5


小鼠

Cd79a


Cd79b


Cd19


Cd45r(B220)


Bank1


Ms4a1



Monocyte(CD45+CD11B+,髓系)

由于单核细胞是巨噬细胞的前体细胞,且两者在多种组织微环境或实验处理条件下常连续分布、表型重叠,区分界限较为模糊。因此,在相关分析中可视具体情况将Monocyte/Macrophage汇总表述,以更准确地反映这一动态连续的细胞谱系。

物种

基因

备注

S100A8

极高表达,但特异性低。在中性粒细胞中表达最高

S100A9

CD14

经典单核细胞上高表达,但炎症中性粒也可能表达(通常很低)

FCGR1A(CD64)

区分单核/巨噬细胞与中性粒细胞的关键标记

FCN1


LYZ


FCGR3B阴性



经典单核细胞(CD14⁺⁺CD16⁻):CD14,FCN1,VCAN,S100A8,CCR2,FCGR1A(CD64)

中间单核细胞(CD14⁺CD16⁺):CD14(低于经典),FCGR3A(CD16),HLA-DRA,CCR5

非经典单核细胞(CD14⁻CD16⁺):FCGR3A,CX3CR1,CDKN1C,LILRB2

物种

基因

备注

小鼠

Ly6c1


Ly6c2


Cx3cr1


Ccr2


S100a8

极高表达,但特异性低。在中性粒细胞中表达最高

S100a9

Cd14

经典单核细胞上高表达,但炎症中性粒也可能表达(通常很低)

Fcgr1(Cd64)

区分单核/巨噬细胞与中性粒细胞的关键标记

经典单核细胞:Ly6c++ Cx3cr1- Ccr2+

非经典单核细胞:Ly6c- Cx3cr1+Ccr2-

Macrophage(CD45+CD11B+,髓系)


物种

基因

备注

CD68


CD163

M2型巨噬细胞的经典表面标志

AIF1

脑组织CD68+AIF1+ 细胞几乎可以确定是Microglia

CSF1R


肿瘤相关巨噬细胞TAMs:LYVE1、SPP1、APOE、TREM2、FABP5、C1QA、C1QB、C1QC、CD9。

促血管生成TAMs:高表达SPP1、APOE、TREM2。

抗炎/稳态TAMs:表达MRC1(CD206)、CD163、MAFB。

物种

基因

备注

小鼠

Cd68


Aif1

脑组织Cd68+Aif1+ 细胞几乎可以确定是Mircoglia

Csf1r


肿瘤相关巨噬细胞(TAMs):Lyve1、Spp1、Apoe、Trem2、C1qa,C1qb,C1qc、Fabp5、Cd9

** 组织特异性巨噬细胞标记 **

小胶质细胞 (Microglia):

AIF1/Aif1(Iba1),TMEM119/Tmem119(最特异性),P2RY12/P2ry12(静息小胶质),CX3CR1/Cx3cr1。

肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophages):

MARCO/Marco,FABP4/Fabp4,PPARG/Pparg。结合多标记物及组织定位。

库普弗细胞(Kupffer Cells,肝):

Clec4f(小鼠),VSIG4/Vsig4,TIMD4/Timd4。

Neutrophil(CD45+CD11B+,髓系)

物种

基因

备注

FCGR3B(CD16B)


CSF3R(CD114)


MMP8


MMP9


CXCL8(IL-8)


S100A8


S100A9


C5AR1(CD88)

C5a受体,中性粒高表达

CD14阴性

与monocyte区分

N1亚群(经典/保守中性粒细胞):S100A8、S100A9、MMP8、MMP9、CSF3R

N2亚群(I型干扰素应答):IFIT1、IRF7、RSAD2

N5亚群(肿瘤特异性中性粒细胞):CCL3、CSF1、CSTB、CTSB,IRAK2

物种

基因

备注

小鼠

Ly6g


Csf3r


Mmp8


Mmp9


S100a8


S100a9


Cxcr2


C5ar1


Cd14阴性


N1亚群(经典/保守中性粒细胞):S100a8、S100a9、Mmp8、Mmp9、Csf3r

N2亚群(I型干扰素应答):Ifit1、Irf7、Rsad2

N5亚群(肿瘤特异性中性粒细胞):Ccl3、Csf1、Cstb、Ctsb

NK cells(CD45+,通常CD11B-)


物种

基因

备注

NCAM1(CD56)


NCR1

NK细胞特异性激活受体,成熟NK

KLRD1

NK细胞最重要的抑制性受体之一

GNLY

NK细胞及细胞毒性T细胞

ITGA2(CD49B)


CD3阴性


CD56^bright:高表达CD56,低表达CD16,主要产生细胞因子(免疫调节)

CD56^dim:低表达CD56,高表达CD16(FCGR3A),主要发挥细胞毒作用(杀伤功能)

物种

基因

备注

小鼠

Ncr1(Nkp46)


Klrb1c(NK1.1,CD161)


Itga2

成熟NK

Klrd1


Gnly

NK细胞及细胞毒性T细胞

Cd3阴性


DC(CD45+,多数CD11b-或低,cDC2部分+,pDC-)

◆  人:共同表达HLA-DRA,HLA-DPB1(pDCs静息时表达较低)

DC类型

基因

备注

cDCs

CD11C

cDC最常用标志,但巨噬细胞、部分B细胞也表达,pDC里低表达

cDC1

XCR1


CLEC9A


CADM1

辅助标志

CTHBD(CD141)


BATF3

转录因子

cDC2

CD1C


FCER1A(CD301)


CD11B

在cDC里,是cDC2的特征marker,与cDC1区分

pDCs

IL3RA(CD123)


CLEC4C(CD303)


LILRA4(ILT7)


IRF7

功能标志,scRNA中高表达

BST2


NRP1(CD304)

也表达于Treg和神经元

◆  小鼠:H2-Aa,H2-Ab1(所有抗原呈递分子共有α链,最稳定标志)

DC类型

基因

备注

cDCs

Cd11c

cDC最常用标志,pDC里低表达

Zbtb46

但肠道里也发现ILC3(尤其是CCR6+亚群)高度表达

cDC1

Xcr1


Cd8a

淋巴组织,脾脏,胸腺中

Itgae(Cd103)

非淋巴组织。与Cd8a互斥

Clec9a


Batf3

谱系决定转录因子

Irf8

与Batf3协同

cDC2

Itgam(Cd11b)


Sirpa(Cd172a)

与cDC1区分

Clec10a(Cd301)


Klf4

转录因子,cDC2发育

Irf4

与Klf4协同,cDC2决定

pDCs

Siglech

人CD303同源物

Bst2


Ly6c

经典单核细胞最高,需结合其他标记

Irf7

pDC的特征性转录因子


Mast Cells(CD45表达量低于淋巴细胞,分选容易被忽略,最好结合CD117)


物种

基因

备注

TPSAB1


CPA3


KIT(CD117)


TPSB2


小鼠

Tpsab1

存疑

Cpa3


Kit


Tpsb2


【参考文献】

【1】.Zilionis R, Engblom C, Pfirschke C, Savova V, Zemmour D, Saatcioglu HD, Krishnan I, Maroni G, Meyerovitz CV, Kerwin CM, Choi S, Richards WG, De Rienzo A, Tenen DG, Bueno R, Levantini E, Pittet MJ, Klein AM. Single-Cell Transcriptomics of Human and Mouse Lung Cancers Reveals Conserved Myeloid Populations across Individuals and Species. Immunity. 2019 May 21;50(5):1317-1334.e10. doi: 10.1016/j.immuni.2019.03.009. Epub 2019 Apr 9. PMID: 30979687; PMCID: PMC6620049.

【2】.Qian H, Wang W, Pan J, Zhao M, Gao L, Zeng J, Gong H, Zhangyuan G, Li Z, Zhang M, Shen X, Weng Y, Deng X, Huang Y. Comprehensive single-cell analysis reveals mast cells' roles in cancer immunity. Oncogene. 2025 Nov;44(45):4427-4439. doi: 10.1038/s41388-025-03590-y. Epub 2025 Oct 10. PMID: 41073552.

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