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Western Blot

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Western Blot

  • 所属分类:常规分子生物学技术

  • 点击次数:
  • 发布日期:2018/11/20
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详细介绍

Western blot,也称Western、Western blotting、Western印迹,是使用抗体检测蛋白的应用很广泛且的技术方法。

 

技术原理

与 Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝 酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

 

技术流程

表观组学技术服务

1、 组织或细胞采集

2、 样品制备

3、 SDS-PAGE

4、 转膜

5、 一抗孵育

6、 二抗孵育

7、 显影 

 

服务特点

1. 分辨率高,采用SDS-PAGE变性电泳。底片是DAB发光液显色(Ecl);

2. 灵敏度高,可检测到pg级。我们可供选择的内参包括:GAPDH,β-actin;

3. 准确性高,通过与内参蛋白比较靶蛋白的相对含量。

 

样品要求

1. 足量新鲜的组织或细胞样品;标本重量最好不低于5mg;

2. 标本取材后要-80℃保存,干冰运输

3. 相应的一抗,如委托我们购买需要提供一抗的品牌及其货号

4. 目的蛋白相关的文献资料。

客户须知:

对预做实验提供的样品要求:应是新鲜的组织细胞样品,需低温保存提供到我公司

实验所用试剂;除第一抗体外,所有试剂免费,用户无须另行购买

因用户所提供的样品或试剂所导致的实验问题,由用户负责。

结果展示:

基因表达调控 


本文网址:http://www.igenebook.com/product/566.html

关键词:基因表达定量,基因表达调控,表观组学技术服务

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