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酵母单杂交

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酵母单杂交

  • 所属分类:常规分子生物学技术

  • 点击次数:
  • 发布日期:2018/11/20
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详细介绍

酵母单杂交(Yeast One-Hybrid,Y1H)是用于研究DNA-蛋白质之间相互作用的技术。可快速鉴定与特定调节DNA序列(bait序列)相互作用的蛋白质,除了找到转录因子,还可有获得DNA复制蛋白、修复蛋白及抑制蛋白等相关蛋白。酵母单杂交还可检测蛋白异构体(isoform)与DNA特异性相互作用。

 

技术原理

许多真核生物的转录因子由物理和功能上独立的 DNA 结合区(DNA-bindingdomain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成,酵母单杂交体系的原理是将已知的特定顺式作用元件构建到基本启动子的上游,把报告基因连接到基本启动子的下游。然后将编码待测转录因子cDNA与已知酵母转录激活结构域融合表达载体导入酵母细胞,该基因如果能够与顺式作用元件相结合,就能激活基本启动子,使报告基因得到表达。

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技术流程

基因表达定量 

 

样品要求

1、 组织或细胞

2、 promoter基因序列/质粒


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关键词:基因表达定量,表观组学技术服务,基因表达调控

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