您好!欢迎来到爱基百客的网站

表观组学技术服务

科技服务

联系我们

武汉爱基百客生物科技有限公司

电话:027-87606602(市场部)  

          027-62431231(行政部)

传真:027-87606602

邮箱:support@igenebook.com

地址:武汉市东湖高新区高新大道888号高农生物园高农国际1栋  

网址:www.igenebook.com


酵母双杂交

您的当前位置: 首 页 >> 产品中心 >> 常规分子生物学技术

酵母双杂交

  • 所属分类:常规分子生物学技术

  • 点击次数:
  • 发布日期:2018/11/20
  • 在线询价
详细介绍

酵母双杂交(Yeast two hybrid, Y2H)技术是利用酵母遗传学方法分析蛋白质之间的相互作用,被广泛应用于蛋白质组学、细胞信号转导和功能基因组学等领域,已成为分子生物学研究领域的重要实验手段。经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于还可发现与已知蛋白相互作用的未知蛋白。

 

技术原理

转录活化蛋白可以和DNA上特异的序列结合而启动相应基因的转录反应。这种DNA 结合与转录激活的功能是由转录活化蛋白上两个相互独立的结构域即DNA 结合结构域(Binding Domain, BD)和转录活化结构域(Activation Domain,AD)分别来完成的,并且这两个结构域对于基因的转录活化都是必须的。目前酵母双杂交实验采用的系统有LexA系统和Gal4系统两种。在LexA系统中,DNA结合结构域由一个完整的原核蛋白LexA构成,转录活化结构域则由一个88个氨基酸的酸性的大肠杆菌多肽B42构成,它在酵母中可以活化基因的转录; 在Gal4系统中,BD和AD分别由Gal4蛋白上不同的两个结构域(1-147aa与768-881aa)构成。在利用GAL4系统筛选cDNA文库或研究蛋白间的相互作用时,DNA结合结构域与靶蛋白即"诱饵"相结合,转录活化结构域与文库蛋白或要验证的蛋白相结合。一般情况下,单独的BD可以与GAL4上游活化序列(GALUAS)结合但不能引起转录,单独的AD则不能与GALUAS结合,只有当BD与AD分别表达的融合蛋白由于相互作用而导致两者在空间上相互靠近时,BD与AD才能与GALUAS结合并且引起报道基因的转录。在BD与AD要导入的酵母菌AH109中,通过基因工程的方法在GAL4 UASs和启动子的下游构建了3个报道基因--ADE2,HIS3,MEL1(或LacZ),因此可以通过营养缺陷筛选和酵母菌表型的改变来筛选或验证两个蛋白之间是否存在相互作用。GAL4系统的原理如图所示

表观组学技术服务 

酵母双杂交系统工作原理


技术流程

基因表达调控

 

样品要求

1、新鲜组织材料、冻存材料;

2、高质量RNA、诱饵基因的模板。

3、尽可能详尽的实验相关信息。


本文网址:http://www.igenebook.com/product/568.html

关键词:表观组学技术服务,基因表达调控,基因表达定量

上一篇:荧光定量pcr
下一篇:酵母单杂交

最近浏览:

联系我们

企业名称:武汉爱基百客生物科技有限公司

电话:027-87606602(市场部)  

          027-62431231(行政部)

传真:027-87606602

邮箱:support@igenebook.com

地址:武汉市东湖高新区高新大道888号高农生物

          园高农国际1栋  

网址:www.igenebook.com


表观组学技术服务

热推产品  |  主营区域: 江苏 天津 武汉 上海 北京 湖北
  • 在线客服
  • 联系电话
    027-8760660
  • 在线留言
  • 官方微信
  • 在线咨询
    欢迎给我们留言
    请在此输入留言内容,我们会尽快与您联系。
    姓名
    联系人
    电话
    座机/手机号码
    邮箱
    邮箱
    地址
    地址