武汉爱基百客生物科技有限公司
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DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现,是表观遗传学的重要内容。DNA甲基化过程会使甲基添加到DNA分子上,例如在胞嘧啶环的5'碳上:这种5'方向的DNA甲基化方式可见于所有脊椎动物。WGBS(Whole-genome bisulfite sequencing)被视为DNA甲基化检测的“金标准”。
技术原理
其原理是用Bisulfite转化,将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U,进行PCR扩增后变成T,与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来,再结合高通量测序技术,与参考序列比对,即可判断CpG/CHG/CHH位点是否发生甲基化,特别适用于绘制单碱基分辨率的全基因组DNA甲基化图谱。
技术流程
分析流程
样品要求
l DNA:≥2μg(qubit)
l OD260/280为1.8-2.0
案例分享
通过对268例CLL患者的正常B细胞与恶性B细胞,我们发现肿瘤主要来源于正常发育阶段反映的成熟状态的连续性。确定了潜在的致病作用的转录因子在CLL中的作用。
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