WGBS

DNA甲基化（DNA methylation）为DNA化学修饰的一种形式，能在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现，是表观遗传学的重要内容。DNA甲基化过程会使甲基添加到DNA分子上，例如在胞嘧啶环的5'碳上：这种5'方向的DNA甲基化方式可见于所有脊椎动物。WGBS（Whole-genome bisulfite sequencing）被视为DNA甲基化检测的“金标准”。

技术原理

其原理是用Bisulfite转化，将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U，进行PCR扩增后变成T，与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来，再结合高通量测序技术，与参考序列比对，即可判断CpG/CHG/CHH位点是否发生甲基化，特别适用于绘制单碱基分辨率的全基因组DNA甲基化图谱。

技术流程

分析流程

样品要求

l DNA：≥2μg(qubit)

l OD260/280为1.8-2.0

案例分享

通过对268例CLL患者的正常B细胞与恶性B细胞，我们发现肿瘤主要来源于正常发育阶段反映的成熟状态的连续性。确定了潜在的致病作用的转录因子在CLL中的作用。