RNA结合蛋白(RBPs)由超过2000种蛋白质组成,它们通过各种方式与转录本相互作用。RBP用来结合和调节RNA的结构和机制非常多样。
目前已知lncRNA、miRNA、circRNA和mRNA都可以与蛋白相互作用,并在转录后发生调控机制。或者想知道自己想研究的RNA是否有可能结合的蛋白?catRAPID :是一种用于估计蛋白质-RNA之间结合倾向的算法。通过结合二级结构,氢键和范德华力,该网站可以非常准确地预测蛋白质-RNA的结合。http://s.tartaglialab.com/page/catrapid_group

主要针对catRAPID omics v2.0这一模块进行介绍。



注意:若无法预测蛋白质结合哪种类型RNA,可选择不同类型RNA依次进行预测。第三步:等待结果。提交完成后一般会在10-30分钟收到包含计算结果的网页链接。
结果主要包括两部分,第一部分为图片,第二部分为表格,重点关注表格。

图1 结果一


第二步:选择第二种进入下图界面,进行信息填写。


图1 结果一

图2为第二个主要结果,星级评定系统帮助用户对结果进行排名。表中总共10列,从左到右依次为:蛋白ID、RNA ID、交互倾向、Z值、交互矩阵、RBP倾向、RNA结合区域、RNA结合基序、保守的相互作用、星级评定。蛋白ID:就是预测到的蛋白,点击会进入到UniProt网站的相应蛋白页面。RNA ID:就是我们输入的RNA,点击会显示该RNA的序列。交互倾向:一种蛋白质(或区域)和一个RNA(或区域)之间相互作用概率的度量。Z值:基于相互作用倾向的平均值和相对于RNA长度的西格玛的动态Z评分归化。交互矩阵:以热图的形式显示预测相互作用的蛋白质(y轴)和RNA (x轴)区域。热图的红色阴影表示单个氨基酸和核苷酸对的相互作用评分。RNA结合区域:在蛋白质序列中发现的RNA结合结构域发生次数。RNA结合基序:在RNA序列上发现的RNA结合基序的实例。保守的相互作用:基于相互作用倾向,对具有较高RBP倾向的蛋白质给予更高的优先级。星级评定:分数是三个单独值的总和,即catRAPID标准化倾向、RNA/DNA结合域和无序区域的存在以及已知RNA结合基序的存在。
第一步:与前面两种情况相似,选择第三种进入下图界面,进行信息填写。



从结果来看输入的蛋白和RNA是有结合的,再点击RNA-Binding Domains可以得到RNA可能结合在蛋白的哪一段序列,示例如下:

再点击RNA-Binding Motifs可以得到在RNA序列上发现的RNA结合序列的信息,示例如下:

依据matched_sequence的结果可以进行后续的RIP-seq以及RIP-qPCR等验证。爱基百客可以提供这两个技术服务,有相关需求的老师可以联系我们。