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武汉爱基百客生物科技有限公司(简称爱基百客),位于武汉高农生物园,办公面积逾3000平方米,是一家专注于表观组学、单细胞时空组学和高通量测序分析服务的新型生物科技企业。


公司旨在为客户提供专业的科研服务,运营至今合作的科研客户近千家,涵盖国内知名科研院所、高校以及相关生物企业,运营至今销售额超1亿元,科研成果曾多次在Science、Cancer Cell、Plant Cell、Nature Communications、J HEMATOL ONCOL等国际高水平学术期刊发表,受到了客户广泛好评,是国内成长最迅速的多组学科研服务企业之一。

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TECHNOLOGY SERVICE

科技服务

详细说明

RIP-seq

  • 产品介绍
  • 案例分析

RIP-seq(RNA Immunoprecipitation sequencing)


产品介绍

RNA免疫共沉淀(RNA Immunoprecipitation,RIP)是研究细胞内RNA与蛋⽩结合情况的技术,RIP利⽤⽬标蛋⽩的抗体将相应的RNA-蛋⽩复合物(RBP)沉淀下来,分离纯化捕获的RNA,结合⾼通量测序技术对⽬标RNA 进⾏测序分析。RIP可以看成是普遍使⽤的染⾊质免疫沉淀 ChIP 技术的类似应⽤,蛋⽩结合对象为RNARIP-seq即对富集得到的RNA ⽚段进⾏⾼通量测序,是了解转录后调控⽹络动态过程的有⼒⼯具,能够有效探究在基因组范围内发现与蛋⽩或蛋⽩复合物相结合的RNA。

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图:RIP-seq实验流程


技术路线:

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样本要求:

细胞:1×107 

动物组织:5 g

植物组织5 g

真核微生物:500mg


建库测序:

测序策略:NovaSeq6000, PE150

测序深度:6-12 G


项目周期:

45个工作日


案例分析

【项⽬⽂章】《hnRNPU是小鼠精原干细胞库建立所必需的》

hnRNPU is required for spermatogonial stem cell pool establishment in mice

期刊:Cell Reports|影响因⼦:6.9|发表时间:2024年|发表单位:华中科技大学同济医学院


研究背景:

精原干细胞(SSCs)是负责精子发生的干细胞,具有自我更新和分化产生功能性精子的能力。SSCs的持续再生对于维持雄性生育力至关重要。然而,SSC池的发育起源尚不清楚。在哺乳动物中,SSCs源自名为 prospermatogonia(ProSG)的前精原细胞,依次发育为增殖型前精原细胞(M-ProSG)、初级过渡型前精原细胞(T1-ProSG)和次级过渡型前精原细胞(T2-ProSG)三种类型。ProSG的迁移和分化过程对于SSC池的建立至关重要,但这一过程的调控机制仍不完全清楚。


研究结果:

  在此,我们证实了 hnRNPU 对于精原干细胞(SSC)库的建立至关重要。在雄性小鼠中,前精原细胞(ProSG)中 hnRNPU 的条件性缺失会导致精子发生停滞并引致不育。hnRNPU 缺陷型前精原细胞无法分化并迁移至基底膜,从而无法在幼年期建立 SSC 库。此外,hnRNPU 的缺失导致前精原细胞积聚,并破坏了 T1 型前精原细胞向 T2 型前精原细胞的转变过程。单细胞转录组分析显示,生殖细胞处于有丝分裂静止状态,并且在 hnRNPU 耗竭后丧失了其独特的身份特征。我们进一步表明,hnRNPU 能够结合 Vrk1、Slx4 和 Dazl 的转录本,这些转录本已被发现在 hnRNPU 缺陷的睾丸中存在异常的选择性剪接。这些观察结果为 SSC 库的建立提供了重要见解,并可能对男性生育能力具有转化医学意义。



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图:hnRNPU结合pre-mRNA并与RNA结合蛋白相互作用



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