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武汉爱基百客生物科技有限公司(简称爱基百客),位于武汉高农生物园,办公面积逾3000m2,是一家专业提供单细胞与空间组学测序分析、表观组学科研服务和高通量测序分析的新型生物科技服务企业。

公司旨在为客户提供最专业的科研服务,运营至今合作的科研客户近千家,涵盖国内知名科研院所、高校以及相关生物企业,运营至今销售额超1亿元,科研成果曾多次在Science、Cancer Cell、Plant Cell、Nature Communications、J HEMATOL ONCOL等国际高水平学术期刊发表,受到了客户广泛好评,是国内成长最迅速的高通量测序科研服务企业之一。

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基于SSR数据的GenAlEx遗传多样性分析(SSR专题)


    • 1 GenAlEx软件介绍

    • 2 GenAlEx分析

      • 2.1 软件下载和装配

      • 2.2 SSR数据整理

      • 2.3 遗传距离计算

      • 2.4 基于标记的遗传多样性分析

      • 2.5 基于群体的遗传多样性分析

      • 2.6 Nei’s 遗传距离和遗传相似性

      • 2.7 基因流分析

      • 2.8 AMOVA分析(分子遗传变异方差分析)

      • 2.9 PCA分析

    • 3 文末福利

1. GenAlEx软件介绍

GenAlEx(Genetic Analysis in Excel) 被设计为一个用户友好的EXCEL加载宏,具有直观和一致的界面,无需编程基础,能在大多数用户熟悉的EXCEL软件环境中分析广泛的群体遗传数据。

2 GenAlEx分析

2.1 软件下载和装配

从GenAlEx官网下载软件,目前最新版本是GenAlEx 6.5。

下载地址:https://biology-assets.anu.edu.au/GenAlEx/Download.html

下载.png

下载解压后会得到一个 .xlam 为后缀名的EXCEL宏文件。将该文件拖到提前准备好的SSR EXCEL数据表格,然后启用宏,即可进行后续分析。

如下图选项框出现GenAlEx即加载成功。

下载 (1).png

2.2 SSR数据整理

GenAlEx可识别多种类型数据格式,如每个标记只有1列的单倍体形式数据,0 1矩阵数据和多种等位基因基因的数据。缺失数据用-1表示。

详细数据格式如下图所示:

下载 (2).png

2.3 遗传距离计算

按照下图操作,点击OK,即可计算出样本间的遗传距离矩阵。

下载 (3).png


按照上图操作,第三选择genetic by pop选项,点击OK,即可计算出群体间的遗传距离矩阵。


下载 (4).png

2.4 基于标记的遗传多样性分析

在GenAlEx下拉菜单选择Frequency,弹出如下界面:


下载 (5).png


继续点击OK,弹出如下界面:


下载 (6).png


其中箭头相关的统计建议都加上。会生成一系列统计Sheet表格,包括遗传多样性指标、基因流等。如下图:


下载 (7).png


其中HFL Sheet红框部分计算出了标记常用的遗传多样性指标。

统计量释义如下:

  • number of samples(N):样品数量

  • the number of alleles (Na):等位基因数量

  • the effective number of alleles (Ne):有效等位基因数

  • the information index (I):信息指数

  • the observed heterozygosity (Ho):观测杂合度

  • the expected heterozygosity (He) :期望杂合度

  • unbiased expected heterozygosity (uHe):无偏期望杂合度

  • Fixation index (F):固定指数

  • Percentage of polymorphic information (P%):多态信息百分比

2.5 基于群体的遗传多样性分析

HFP Sheet红框部分计算出了群体常用的遗传多样性指标。如下图:


下载 (8).png

2.6 Nei’s 遗传距离和遗传相似性

NeiP Sheet红框部分计算出了Nei’s 遗传距离和遗传相似性矩阵。如下图:


下载 (9).png

2.7 基因流分析

基因流(也称基因迁移)是指从一个物种的一个种群向另一个种群引入新的遗传物质,从而改变群体“基因库”的组成。通过基因交流向群体中引入新的等位基因,是遗传变异一个非常重要的来源,影响群体遗传多样性,产生新的性状组合。基因流会减少种群之间的差异。较大的基因流可以增加遗传多样性、减少遗传漂变和遗传固定的风险,并且有助于适应环境变化和抵御疾病。这对于野生动植物种群的健康和生存可能是有益的。

下表是基因流分析的结果:


下载 (10).png

统计量释义如下:

  • Fis:群体内近交系数

  • Fst:遗传分化系数

  • Fit:总群体近交系数

  • the number of effective migrants (Nm):基因流

2.8 AMOVA分析(分子遗传变异方差分析)

在GenAlEx下拉菜单选择AMOVA,如下图。弹出界面一直点击OK即可完成分析。


下载 (11).png


下表是AMOVA分析的结果。统计了组内和组间的变异水平。


下载 (12).png

另外 GenAlEx 还会自动生成一个AMOVA分析饼图。

下载 (13).png

2.9 PCA分析

PCoA(principal co-ordinates analysis)是一种研究数据相似性或差异性的可视化方法,通过一系列的特征值和特征向量进行排序后,选择主要排在前几位的特征值,PCoA 可以找到距离矩阵中最主要的坐标,结果是数据矩阵的一个旋转,它没有改变样品点之间的相互位置关系,只是改变了坐标系统。通过PCoA 可以观察个体或群体间的差。

利用GD遗传距离矩阵Sheet,在GenAlEx下拉菜单选择PcoA,如下图。弹出界面选中Color Code Pops可用不同颜色标识出不同亚群的材料,点击OK即可完成分析。


下载 (14).png


PCA可视化图结果如下。小编这里是随机生成数据,故无明显分组特征。


下载 (15).png

3. 文末福利

GenAlEx 支持多种软件格式的数据转化导出,包括经典的popgene、genepop、structure等软件。解决了不同软件数据格式制备的痛点。如下图:


下载 (16).png


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